Biopsia lichida bazată pe testarea ADN-ul tumoral circulant (ctDNA): aplicații în diagnosticul cancerului și depistarea bolii reziduale minime
CtDNA reprezintă o fracțiune din ADN-ul liber în sânge (cfDNA) eliberată de celulele tumorale prin procese precum apoptoza, necroza și secreția activă. Este un instrument esențial în biopsia lichidă, oferind o alternativă non-invazivă la biopsiile tradiționale. CtDNA a devenit un instrument foarte util în oncologia de precizie, deoarece permite obținerea unui profil molecular al tumorilor, monitorizarea bolii și personalizarea tratamentului cancerului. CtDNA oferă o perspectivă completă asupra profilului genetic al cancerului, utilizând probe ușor accesibile, precum plasma sanguină.
CtDNA are câteva caracteristici unice care îl fac deosebit de util în oncologie. Concentrația sa în sânge este scăzută, între 1 și 10 ng/mL, iar timpul său de înjumătățire variază de la câteva minute la câteva ore. Deși aceste caracteristici pot complica detecția, ele permit obținerea de informații despre mutațiile genetice, modificările epigenetice (precum metilarea ADN-ului) și variațiile structurale ale genomului, cum ar fi inversiile, translocațiile și delețiile. CtDNA se distinge prin capacitatea sa de a detecta anumite schimbări moleculare înainte ca acestea să devină vizibile prin metode imagistice convenționale.
Din punct de vedere clinic, ctDNA este utilizat pentru diagnosticarea cancerului, monitorizarea răspunsului la tratament și detectarea precoce a bolii reziduale minime (MRD). CtDNA permite identificarea mutațiilor specifice, cum ar fi cele din genele EGFR și KRAS în cancerul pulmonar sau colorectal. De asemenea, capacitatea sa de a evalua MRD facilitează adaptarea terapiei adjuvante, contribuind la prevenirea recidivelor. Nivelurile ctDNA pot fi corelate cu volumul tumoral, stadializarea bolii si diseminarea la distanță. În situațiile în care biopsia tradițională nu poate fi efectuată sau când este nevoie de decizii rapide privind tratamentul, ctDNA oferă o alternativă non-invazivă.
Metodele de detecție a ctDNA au evoluat considerabil, incluzând tehnologii avansate precum revers transcrierea prin reacția de polimerizare în lanț (RT-PCR), PCR digital (dPCR) și secvențierea de generație următoare (NGS). RT-PCR este o metodă rapidă rapid, însă este limitată doar în detecția mutațiilor cunoscute. Pe de altă parte, dPCR permite detectarea mutațiilor rare cu sensibilitate crescută, iar NGS oferă o acoperire genomică extinsă, fiind capabilă să analizeze în paralel milioane de fragmente ADN. Metodele bazate pe analiza metilării ADN-ului poate duce la identificarea cancerelor cu debut prin determinări secundare cu punct de plecare neprecizat.
Cu toate acestea, utilizarea ctDNA poate avea câteva limitări. Printre acestea se numără concentrațiile scăzute ale ctDNA în sânge și lipsa standardizării metodelor de analiză în prezent. Variația tehnicilor de colectare și prelucrare a probelor influențează semnificativ rezultatele testelor, de aceea sunt necesare ghiduri pentru validarea acestei metode.
CtDNA reprezintă o tehnologie revoluționară în oncologie, oferind oportunități fără precedent pentru diagnosticarea precoce, monitorizarea bolii și alegerea unei terapii țintite. Progresele în tehnologii precum NGS și analiza epigenetică vor continua să extindă utilizarea ctDNA, însă integrarea clinică a acestui marker necesită o cooperare multidisciplinară pentru a avea cele mai bune rezultate.
Citește și:
- #ASCO 2017: Biopsia lichidă 2.0: detectarea precoce a cancerului prin analiza profundă a ADN-ului din sânge
- Cum putem integra biopsia lichidă în practica medicală pentru ghidarea tratamentului cancerului și depistarea timpurie a recidivelor? Implică-te în consultarea publică GUIDE.MRD!
- GUIDE.MRD. Rolul biopsiei lichide în depistarea bolii reziduale minime: aplicații în cancerul pulmonar, colorectal și pancreatic